溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫文4℃(冰箱溫度)等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的適宜溫度。在建立ELISA辦法作反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研討時(shí),實(shí)驗(yàn)標(biāo)明,兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小時(shí),產(chǎn)品的生成可達(dá)高峰。為加快反應(yīng),可進(jìn)步反應(yīng)的溫度,有些實(shí)驗(yàn)在43℃進(jìn)行,但不宜選用更高的溫度。抗原抗體反應(yīng)4℃更為*,在放射免疫測(cè)定中多使反應(yīng)在冰箱中過夜,以構(gòu)成zui多的堆積。但因所需時(shí)刻太長,在ELISA中一般不予選用。
溫育保溫的考究:
保溫的辦法除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,一般均選用水浴,可將ELISA板置于水浴箱中,ELISA板底應(yīng)貼著水面,使溫度敏捷平衡。為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此時(shí)可讓反應(yīng)板漂浮在水面上。若用保溫箱,ELISA板應(yīng)放在濕盒內(nèi),濕盒要選用傳熱性杰出的資料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,zui終將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)矩的溫度,特別是在氣溫較低的時(shí)分更應(yīng)如此。無論是水浴仍是濕盒溫育,反應(yīng)板均不宜疊放,以確保各板的溫度都能敏捷平衡。室溫溫育的反應(yīng),操作時(shí)的室溫應(yīng)嚴(yán)峻束縛在規(guī)矩的范圍內(nèi),標(biāo)準(zhǔn)室溫溫度是指20-25℃,但具體操作時(shí)可根據(jù)說明書的要求操控溫育。室溫溫育時(shí),ELISA板只需平置于操作臺(tái)上即可。應(yīng)留心溫育的
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