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人ELISA試劑盒的血清培養(yǎng)基培養(yǎng)
更新時間:2015-05-21   點擊次數:3205次

    我司供應的胎牛血清、進口血清、放免試劑盒、檢測試劑盒、ELISA試劑盒、培養(yǎng)基、標準品等,產品,質量保證。為了讓您在人ELISA試劑盒實驗前能購買到的試劑產品,今天要為您介紹的是:ELISA試劑盒實驗之血清質量檢測。
理化性質:如滲透壓、pH值、蛋白電泳圖譜、蛋白含量、激素水平、內毒素等。蛋白含量包括血清總蛋白含量(不低于35-45g/L)、球蛋白含量(應小于20g/L)、血紅蛋白含量等。其中球蛋白含量是一 項非常重要的指標,血清中球蛋白主要是抗體,球蛋白含量越低血清質量越高。血紅蛋白也是越低越好。 
微生物檢測:包括細菌、真菌、支原體、病毒等。特別是對支原體、病毒的檢測,支原體是一種很小的微生物,可通過孔徑22u的濾膜。支原體、病毒污染在光 學顯微鏡下難于察覺,細胞也能生長繁殖,但會影響實驗結果。檢測支原體的方法很多,如培養(yǎng)法、PCR法、熒光染色法、電鏡觀察法等。 
促生長效果:這是血清重要的特性之一,應當以培養(yǎng)的細胞來檢測。有兩種方法:克隆形成率、貼瓶率測定法和連續(xù)傳代培養(yǎng)法。 
(1)克隆形成率測定:一般以懸浮生長的細胞為培養(yǎng)對象,按有限稀釋法做克隆化培養(yǎng),將不同批號的血清配制成不同濃度的培養(yǎng)基,細胞也稀釋成不同濃度,接種到96孔板,每孔200ul,培養(yǎng)一定時間,統(tǒng)計有克 隆生長的孔,計算出百分比,再與對照的標準血清相比較,就可看出不同批號血清間的區(qū)別。比較低的濃度,更能觀察出血清質量間的細微差別。 
(2) 貼瓶率測定:是以貼壁細胞為培養(yǎng)對象,將細胞稀釋至低密度,接種至平皿,每皿200或100個細胞,以不同濃度,人ELISA試劑盒培養(yǎng)一定時間后棄培養(yǎng)基,染色后統(tǒng)計集落數,計算出集落數占接種細胞數的百分比,同樣再與標準血清比較,判斷血清質量高低。 
(3)連續(xù)傳代培養(yǎng)法:是將細胞培養(yǎng)于 3個一定體積的培養(yǎng)瓶中,待測血清配制為5%濃度,一般于第七天收集細胞,計數,取平均值,中間可以更換一次培養(yǎng)基。連續(xù)測試三個周期以上, 觀察細胞生長狀況,并將每次的計數結果與標準血清的測試結果比較。 
    對于使用者,判斷血清質量先從外觀入手。好的血清應該是透明清亮,土或棕,無沉淀或極少沉淀,比較粘稠。如發(fā)現血清渾濁、不透明、含許多沉淀物,說明血清污染或血清中的蛋白質變性;若血清呈棕紅色,說明血清中的血紅蛋白含量太高,取材時有溶血現象;人ELISA試劑盒如果搖晃時感覺液體稀薄,說明血清中摻入的生理鹽水太多。如果要進一步了解血清的質量,則應連續(xù)培養(yǎng)某些細胞,觀察細胞生長狀況。

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